2.3 | Urinary cfDNA purificationAft

2.3 | Urinary cfDNA purificationAfter collection from the patients, urine was centrifuged at 2000 g for 30 minutes, and urine supernatants were stored at −80°C. Urine was thawed in a water bath at 27°C, and 4-32 mL (median: 12 mL) supernatants was used for cfDNA purification after centrifugation at 16 000 g for 10 minutes. Urinary cfDNA extraction was carried out with a QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit (QIAGEN, Hilden, Germany) according to the manufacturer's protocol, and cfDNAs were eluted by 50 μL AVE buffer. DNA concentration was meas- ured by a Qubit dsDNA High Sensitivity Assay Kit (Thermo FisherScientific, Waltham, MA, USA).

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2.3 | 尿cfDNA纯化 从患者收集之后，尿液以2000g离心30分钟，和尿 上清液储存在-80℃。尿液在水浴中在27℃解冻，4-32毫升（中值： 12毫升）的混合物在16000克使用上清cfDNA纯化离心后10 分钟。尿cfDNA进行萃取用的QIAamp循环核酸试剂盒 根据制造商的方案（QIAGEN，德国希尔登），和cfDNAs通过将50μL洗脱 AVE缓冲器。DNA浓度为一个量子位的dsDNA高灵敏度测定试剂盒（热meas- ured 费舍尔 科学，沃尔瑟姆，MA，USA）。

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2.3 |尿cfDNA纯化 从患者身上收集后，尿液在2000克下离心30分钟，尿液 上生子储存在+80°C。尿在27°C和4-32 mL的水浴中解冻（中位数： 12 mL）上生子用于离心后 cfDNA 纯化，在 16 000 g 为 10 分钟。使用 QIAamp 循环核酸试剂盒进行尿 cfDNA 提取 （QIAGEN，希尔登，德国）根据制造商的协议，cfDNA被50μL洗脱 AVE 缓冲区。DNA浓度由Qubit dsDNA高灵敏度测定试剂盒（热器）进行检测 费舍尔 科学，沃尔瑟姆，马萨诸塞州，美国）。

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2.3尿cfdna纯化 收集患者尿液后，以2000克离心30分钟，尿液 上清液储存在-80°C下。尿液在27°C水浴中解冻，4-32 ml（中位： 12 ml）上清液在16000 g离心10次后用于cfdna纯化 分钟。用qiaamp循环核酸试剂盒提取尿cfdna （德国Hilden Qiagen）根据制造商的方案，用50μl洗脱cfdnas AVE缓冲器。用qubit-dsdna高灵敏度检测试剂盒测定dna浓度 渔夫 科学，沃尔瑟姆，马萨诸塞州，美国）。

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