ABSTRACTHepatic stellate cells (HSC

ABSTRACTHepatic stellate cells (HSCs) play a crucial role in the progression of liver fibrosis, which can beconsidered as the specific therapeutic target of anti-fibrotic treatment. Targeted induction of HSCs tohepatocytes via delivery of clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)/CRISPRassociated protein 9 (dCas9) system holds promise for hepatic fibrosis treatment. Our study hererevealed that CRISPR/dCas9-VP64 system encapsulated in AML12 cell-derived exosomes could efficiently and successfully be delivered into the HSCs. In turn, the CRISPR/dCas9-VP64 system loaded inthe exosomes can be efficiently released into the HSCs. As a proof-of-concept study, gRNA againsthepatocyte nuclear factor 4a (HNF4a) together with the delivery of CRISPR/dCas9-VP64 systeminduced the HSCs to hepatocyte-like phenotype. In conclusion, our study here revealed that CRISPR/dCas9-VP64 system encapsulated in AML12 cell-derived exosomes could be functional in HSCs, emerging as a gene therapy strategy for hepatic fibrosis

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摘要 ：肝星状细胞（hepatic stellate cells，HSCs）在肝纤维化进程中发挥着至关重要的作用，可被 视为抗纤维化治疗的特异性治疗靶点。 通过提供聚集的规则间隔短回文重复序列 (CRISPR)/CRISPR 相关蛋白 9 (dCas9) 系统将HSC 靶向诱导至肝细胞，有望用于肝纤维化治疗。我们的研究 表明，封装在 AML12 细胞衍生的外泌体中的 CRISPR/dCas9-VP64 系统可以有效且成功地递送到 HSC 中。反过来，加载在外泌体中的 CRISPR/dCas9-VP64 系统 可以有效地释放到 HSC 中。作为一项概念验证研究，gRNA 针对 肝细胞核因子 4a (HNF4a) 连同 CRISPR/dCas9-VP64 系统的递送 诱导 HSCs 形成肝细胞样表型。总之，我们在此的研究表明， 封装在 AML12 细胞衍生的外泌体中的 CRISPR/dCas9-VP64 系统可以在 HSC 中发挥作用，成为肝纤维化的基因治疗策略

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摘要 肝星状细胞（Hepatic stellate cells，HSCs）在肝纤维化的进展中起着至关重要的作用，而肝纤维化可能是一种慢性疾病 被认为是抗纤维化治疗的特定治疗靶点。HSC靶向诱导至 通过聚集的规则间隔短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR传递肝细胞相关蛋白9（dCas9）系统有望用于肝纤维化治疗。我们在这里学习 结果表明，包裹在AML12细胞源性外显体中的CRISPR/dCas9-VP64系统可以充分且成功地交付至HSC。反过来，CRISPR/dCas9-VP64系统将加载到 外显体可以有效地释放到HSC中。作为概念验证研究，gRNA反对 肝细胞核因子4a（HNF4a）与CRISPR/dCas9-VP64系统的传递 诱导HSCs向肝细胞样表型分化。总之，我们的研究表明CRISPR/ dCas9-VP64系统封装在AML12细胞源性外显体中，可在HSC中发挥功能，emerging作为肝纤维化的基因治疗策略

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摘要肝星状细胞(HSCs)在肝纤维化的进展中起着至关重要的作用，肝纤维化可以是被认为是抗纤维化治疗的特定治疗靶点。定向诱导造血干细胞通过成簇的规则间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR u associated protein 9(dcas 9)系统输送肝细胞为肝纤维化治疗带来了希望。我们在这里的研究揭示了包裹在AML12细胞来源的外来体中的CRISPR/dCas9-VP64系统可以有效并成功地递送到HSCs中。反过来，CRISPR/dCas9-VP64系统加载到外来体可以有效地释放到造血干细胞中。作为一项概念验证研究，gRNA反对肝细胞核因子4a (HNF4a)连同CRISPR/dCas9-VP64系统的递送诱导HSCs向肝细胞样表型转化。总之，我们的研究揭示了CRISPR/在AML12细胞衍生的外来体中包裹的dCas9-VP64系统可能在HSC中起作用，成为肝纤维化的基因治疗策略

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