The blood collection and measuremen

The blood collection and measurement of sOX40L, as well as other serum factors were conducted as reported previously.[15] Briefly, peripheral blood samples (5 mL) were collected in tubes containing ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) to obtain monocytes or did not contain EDTA to obtain serum within 24 h of admission. Isopaque-Ficoll gradient centrifugation was conducted to obtain the peripheral venous blood mononuclear cells and monocytes were harvested and collected in RPMI1640 medium. Non-EDTA blood was immersed in ice and the supernatant was obtained after centrifugation with 1500 × g for 10 min at 4°C and then the supernatants were harvested and stored at −70°C. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was subsequently performed using commercial ELISA kits (BD Biosciences, San Diego, CA) to determine the soluble serum levels of PGRN, sOX40L, IL-4, IL-6, and IL-10 following the manufacturer's protocols.

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sOX40L以及其他血清因子的采血和测量如先前报道[15]。简而言之，在入院后24小时内，将外周血样品（5 mL）收集在含有乙二胺四乙酸（EDTA）的试管中以获得单核细胞，或不含EDTA的试管获取血清。进行等速-Ficoll梯度离心以获得外周静脉血单核细胞，并收集单核细胞并收集在RPMI1640培养基中。将非EDTA血液浸入冰中，并在4°C下以1500×g离心10分钟后获得上清液，然后收集上清液并保存在-70°C下。随后，使用市售ELISA试剂盒（BD Biosciences，圣地亚哥，加利福尼亚）进行酶联免疫吸附测定（ELISA），以确定PGRN的可溶性血清水平，

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sOX40L的采血和测量，以及其他血清因子，如前所述。[15] 简单地说，外周血样本（5 mL）被采集在含有乙酰胺四酸（EDTA）的管中，以获得单细胞或不含EDTA，在入院24小时内获得血清。进行异反-Ficoll梯度离心，以获得外周静脉单核细胞和单核细胞在RPMI1640介质中采集和采集。非EDTA血液浸入冰中，在4°C时以1500×g离心10分钟获得超钠，然后以+70°C采集和储存。酶相关免疫吸附剂测定（ELISA）随后使用商用ELISA试剂盒（BD Bioscience，加利福尼亚州圣地亚哥）进行，以确定PGRN、sOX40L、IL-4、IL-6和IL-10的可溶性血清水平。

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如前所述，采集和测量sOX40L以及其他血清因子。[15]简单地说，外周血样本（5mL）在含有乙二胺四乙酸（EDTA）的试管中采集以获得单核细胞，或在入院后24小时内不含EDTA以获得血清。采用等水Ficoll梯度离心法获得外周静脉血单个核细胞，在RPMI1640培养基中采集单核细胞。将非EDTA血液浸入冰中，在4°C下用1500×g离心10分钟后获得上清液，然后在-70°C下收集和储存上清液。随后使用商用ELISA试剂盒（BD Biosciences，San Diego，CA）按照制造商的方案测定PGRN、sOX40L、IL-4、IL-6和IL-10的可溶性血清水平。<br>

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