Step 2: Generation of the pTrcHis2A

Step 2: Generation of the pTrcHis2A(Kan) vector containing glargine proinsulin.Commercially available pTrcHis2A(Kan) vector was modified to include a Kanamycinresistance gene in the middle of the Ampicillin resistance gene to negate the Ampicillinresistance prior to insertion of the proinsulin sequence into the vector. Ampicillin resistanceheightens the potential for allergic reactions to preparations made using vector constructs thatinclude the Ampicillin resistance gene. Therefore it is preferable to eliminate the Ampicillinresistance in the constructs that are prepared and used.

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步骤2：含有甘精胰岛素原的pTrcHis2A（KAN）矢量的生成。 可商购的pTrcHis2A（KAN）载体修改为包括卡那霉素 中的氨苄青霉素抗性基因否定氨苄青霉素的中间抗性基因 胰岛素原子序列插入载体的插入之前的阻力。氨苄青霉素抗性 加剧用于使用矢量构建体做了准备过敏反应的可能性 包括氨苄青霉素抗性基因。因此，优选以消除氨苄青霉素 在于制备和所使用的构建体电阻。

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第2步：生成含有甘精蛋白胰岛素的pTrcHis2A（Kan）载体。 商用 pTrcHis2A（Kan）载体被修改为包括卡那霉素 抗性基因在安比林抵抗基因中间，以否定安比西林 在将蛋白酶序列插入载体之前的阻力。安比林电阻 提高使用载体结构对制剂产生过敏反应的可能性， 包括安比林抗性基因。因此，最好消除安平素 准备和使用构造中的电阻。

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第2步：生成含有甘精胰岛素原的pTrcHis2A（Kan）载体。 将市售ptrchis2a（kan）载体改性为包含卡那霉素 抗氨苄青霉素基因中间的抗氨苄青霉素基因 胰岛素原序列插入载体前的抵抗氨苄西林抗性 提高了对使用载体结构制备的制剂过敏反应的可能性 包括氨苄西林抗性基因因此，最好消除氨苄西林 制备和使用的结构中的阻力。

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