目的:选育出一株高产γ-聚谷氨酸(γ- polyglutamic acid,γ- PGA)的菌株,并优化其发酵培养基。方法:以实验室前期筛选的简体中文翻译

目的:选育出一株高产γ-聚谷氨酸(γ- polyglutamic ac

目的:选育出一株高产γ-聚谷氨酸(γ- polyglutamic acid,γ- PGA)的菌株,并优化其发酵培养基。方法:以实验室前期筛选的芽孢杆菌(Bacillus sp. X-1)为出发菌株,通过化学诱变剂-紫外复合诱变结合脱脂牛奶透明圈法进行筛选,并进行分子生物学鉴定;采用24孔板结合响应面法对菌株的发酵培养基进行快速优化,确定最佳发酵配方。结果:经过16s rDNA序列分析,菌株X-1被鉴定为 Bacillus subtilis。经过3种化学诱变剂-紫外复合诱变,得到一株高产的γ-PGA的突变菌株N-2,诱变后突变株产量达到21.3g/L,比诱变前提高17.2%;通过PB(Plackett- Burman, PB)试验,筛选出3个显著影响γ- PGA产量的因素:葡萄糖、硝酸铵和硫酸锌;用最陡爬坡试验逼近最大产量区,利用Box-Behnken试验(Box-Behnken Deign,BBD)法进行优化,经过250ml锥形瓶发酵验证后,确定了最佳发酵培养基配方为:葡萄糖 37.88;硝酸铵0.41,硫酸锌0.14,谷氨酸钠40,酵母膏8,磷酸二氢钾2,硫酸镁0.1,硫酸猛0.02,发酵终产量为 28g/L,比优化前提高33.17%。结论:多孔板法结合响应面优化法可以显著加速筛选、优化速度,结果可靠。
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