The level of extracellular ROS production was measured using a DCFDA k的简体中文翻译

The level of extracellular ROS prod

The level of extracellular ROS production was measured using a DCFDA kit (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) according to the manufacturer’s protocol, as previously mentioned . In summary, surgically excised mice conjunctiva (four eyes per group) was washed with PBS and 10 M DCFDA and then incubated at 37℃ for 20 minutes. To determine the extracellular ROS production, the cell pellet was analyzed using a FACSCalibur flow cytometer at excitation and emission wavelengths of 488 and 530 nm, respectively. The data analysis was based on 10,000 detected events using flow and image cytometry analysis software. The relative changes in DCFDA fluorescence were expressed as the fold increase compared to that in the UT group.
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使用试剂盒DCFDA根据制造商的方案(Invitrogen,卡尔斯巴德,CA,USA)测量细胞外的ROS产生的水平,如前面提到的。总之,手术切除结膜小鼠(每组4只眼)用PBS洗涤和10μMDCFDA,然后在37℃温育20分钟。为了确定细胞外的ROS产生,使用在激发和发射波长在FACSCalibur流式细胞仪进行分析的细胞沉淀<br>,488和530nm处分别。数据分析是基于使用流量和图像仪分析软件万个检测到的事件。在DCFDA荧光的相对变化表示为相比于UT组中的增加倍数。
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细胞外ROS生产水平是使用DCFDA试剂盒(Invitrogen,卡尔斯巴德,加利福尼亚州,美国)根据制造商的协议,如前所述测量。总之,用PBS和10M DCFDA洗净手术切除小鼠结膜(每组4只眼睛),然后在37°C孵育20分钟。为了确定细胞外ROS的产生,使用FACSCalibur流式细胞仪对细胞颗粒进行分析,其激励和发射波长为<br>分别为 488 和 530 nm。数据分析基于使用流和图像细胞测定分析软件检测到的 10,000 个事件。与UT组相比,DCFDA荧光的相对变化表现为倍数增加。
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如前所述,使用DCFDA试剂盒(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)根据制造商的方案测量细胞外活性氧的产生水平。综上所述,手术切除的小鼠结膜(每组4只眼)用PBS和10m DCFDA清洗,然后在37℃下孵育20分钟。为了测定细胞外活性氧的产生,用流式细胞仪分析细胞颗粒的激发和发射波长为<br>分别为488和530纳米。数据分析基于流式细胞术和图像细胞术分析软件检测到的10000个事件。DCFDA荧光的相对变化表现为与UT组相比增加了一倍。
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