Inclusion bodies were solubilized i

Inclusion bodies were solubilized in 20 mM CAPS (3-(Cyclohexylamino)-1-propanesulfonic acid; Sigma-Aldrich C2632) pH 10 buffer. Te solution was centrifuged at 30,000 × g for 30min at 4°C, and the resulting supernatant was aliquotted and stored at −80°C. Cry proteins were trypsinized to generate a Cry protein active “core”. Briefly, bovine trypsin (Sigma-Aldrich; T1426) was added at 1:20 trypsin:protein ratio (w:w), and incubated at 30°C for 2hours. Cry protein was further purified by anion exchange chromatography using CAPS pH 10.0 binding buffer and elution with the same buffer containing 1M NaCl. Cry protein cores typically eluted with 0.3M NaCl. Purified protein was buffer exchanged to 50mM CAPS pH 10.0.

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（; Sigma-Aldrich公司C2632 3-（环己基氨基）-1-丙磺酸）pH为10的缓冲液包涵体在20mM CAPS中溶解。TE溶液在30000×g的30分钟，在4℃离心，将所得上清等分并储存在-80℃。Cry蛋白进行胰蛋白酶处理，以产生Cry蛋白活性的“核心”。简言之，将牛胰蛋白酶（Sigma-Aldrich公司; T1426）在1:20胰蛋白酶的溶液中加入：蛋白质比（重量：重量），并在30℃温育2小时。Cry蛋白是通过使用CAPS pH 10.0的结合缓冲液和洗脱用含有1M NaCl的相同缓冲液中的阴离子交换层析进一步纯化。Cry蛋白核心典型地洗脱用0.3M NaCl洗涤。纯化的蛋白进行缓冲液交换到50mM的CAPS pH值10.0。

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在20mM CAPS（3-（环己烷）-1-丙烷硫酸中溶解夹杂物;西格玛-阿尔德里希 C2632） pH 10 缓冲液。Te溶液在30，000 μg下在4°C下离心30分钟，所得上清液在+80°C处进行等分并储存。冷冻蛋白被试穿，产生一种Cry蛋白活性"核心"。简单地说，牛胰蛋白酶（西格玛-阿尔德里希;T1426）在1：20胰蛋白酶：蛋白比（w：w）处加入，并在30°C孵育2小时。使用CAPS pH 10.0结合缓冲液和洗脱液，使用含有1M NaCl的相同缓冲液，通过阴联交换色谱进一步纯化哭蛋白。哭蛋白核心通常用0.3M NaCl洗脱。纯化蛋白被缓冲液交换到50mM CAPS pH10.0。

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在20毫米CAPS（（“环己胺-1-丙烷磺酸”；Sigma-Aldrich C2632）pH 10缓冲液中溶解包装体。Te solution was incructed at 30000×g for 30min at 4°C，the resulting supernant was aliquotted and stored at－80°C.cry proteins were trypsinized to generate a cry protein active.”Briefly，Bovine Trypsin（Sigma-Aldrich；T1426）was added at 1:通过阴离子交换色谱法进一步纯化了低温蛋白，使用pH 10.0环管结合缓冲器和同一缓冲器包含1m nacl。蛋白核心典型精制0.3M Nacl纯化的蛋白是缓冲交换至50mm CAPS pH 10.0。<br>

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