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To allow for the incorporation of t

To allow for the incorporation of the peptide into the protein, we initially investigated the incorporation of YKYKY into IGF-1 using a conventional recombinant technology approach (Figure S1). The synthesis of the IGF- 1 derivative was confirmed by PAGE (Figure S2) and western blot analysis using an anti-IGF-1 antibody (Figure S3). After tyrosinase treatment, the hydroxylation of all of the tyrosine residues in the IGF-1 derivative was confirmed by mass spectrometry (Figure 3 a). All of tyrosine residues, including the native tyrosine residues and those introduced by the modification process, were hydrogenated by tyrosinase.
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以允许肽进入蛋白的掺入,我们最初研究YKYKY掺入IGF-1使用常规的重组技术方法(图S1)。的IGF-1衍生物的合成通过PAGE(图S2)和蛋白质印迹分析使用抗IGF-1抗体(图S3)证实。酪氨酸酶处理后,所有在IGF-1衍生物的酪氨酸残基的羟基化通过质谱法(图3)确认。所有酪氨酸残基,其中包括天然的酪氨酸残基与那些由修改过程中引入的,由酪氨酸酶氢化。
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为了允许将肽加入蛋白质中,我们最初使用传统的重组技术方法研究了YKYKY在IGF-1中的结合(图S1)。PAGE(图S2)和西印体分析使用抗IGF-1抗体证实了IGF-1衍生物的合成(图S3)。酪氨酸酶处理后,通过质谱法确认IGF-1衍生物中所有酪氨酸残留物的羟基化( 图3 a)。所有酪氨酸残留物,包括原生酪氨酸残留物和改性过程引入的残留物,均被酪氨酸酶氢化。
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为了将肽并入蛋白质中,我们最初使用传统的重组技术方法研究了YKYKY并入IGF-1(图S1)。IGF-1衍生物的合成通过PAGE(图S2)和使用抗IGF-1抗体的western blot分析(图S3)得到证实。酪氨酸酶处理后,通过质谱法确认IGF-1衍生物中所有酪氨酸残基的羟基化(图3A)。所有的酪氨酸残基,包括天然酪氨酸残基和通过修饰过程引入的残基,都被酪氨酸酶氢化。<br>
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