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For CLSM investigation, 100µl of ex

For CLSM investigation, 100µl of exosomes were mixed with 5µl Dil for 20 min at room temperature. After that, 2 ml PBS was added to bind excess dye. Then labeled exosomes were washed in PBS at 100,000 g for 1 hour. The labeled exosomes were incubated with Ti disks and Ti-pepetides disks for 1 h at 4°C and then rinsed thrice with sterile PBS. Exosomes through chimeric peptides specific binding to Ti surfaces was visualized using CLSM. DFLs were incubated with DiI labeled exosomes in an incubator with 5% CO2 in the dark for 12h and 24h. A 1:1000 DAPI nuclear staining solution was prepared with PBS. The cells were placed on ice, washed three times with PBS and then incubated in the dark for 30 min with the diluted DAPI stain. Four different fields of view in each group were randomly imaged with CLSM.
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为了进行CLSM研究,将100µl外泌体与5µl Dil在室温下混合20分钟。之后,加入2ml PBS以结合过量的染料。然后将标记的外泌体在100,000 g PBS中洗涤1小时。将标记的外泌体与Ti盘和Ti-肽段盘在4°C孵育1小时,然后用无菌PBS冲洗三次。使用CLSM观察到与Ti表面特异性结合的通过嵌合肽的外泌体。将DFL与DiI标记的外泌体在黑暗中于5%CO2的培养箱中孵育12h和24h。用PBS制备1:1000 DAPI核染色溶液。将细胞置于冰上,用PBS洗涤3次,然后在黑暗中与稀释的DAPI染色剂一起温育30分钟。使用CLSM对每组的四个不同视野进行随机成像。
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在CLSM调查中,100μl的外体在室温下与5μl Dil混合20分钟。之后,加入2ml PBS来结合多余的染料。然后标记的外体在 PBS 中以 100,000 g 洗涤 1 小时。标记的外体在4°C下用Ti盘和Ti-pepetides盘孵育1小时,然后用无菌PBS冲洗三次。使用CLSM对通过嵌合肽特异性结合到Ti表面的外体进行可视化。DDFS 与 DII 标记的外体在孵化器中孵育,在黑暗中有 5% 的 CO2,为 12 小时和 24 小时。用PBS准备了1:1000 DAPI核染色溶液。细胞被放置在冰上,用PBS洗涤三次,然后在黑暗中用稀释的DAPI污渍孵育30分钟。每个组中的四个不同的视场使用 CLSM 随机成像。
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对于CLSM研究,将100µl外显体与5µl Dil在室温下混合20分钟。然后加入过量的PBS。然后标记的外显子在10万g的PBS中洗涤1小时。标记的外显体与Ti盘和Ti肽盘在4℃孵育1h,然后用无菌PBS冲洗三次。通过嵌合肽特异性结合到钛表面的外显体用CLSM可视化。DFLs与DiI标记的外显体在5%CO2培养箱中暗孵12h和24h,用PBS制备1:1000的DAPI核染色液。将细胞置于冰上,用PBS洗涤三次,然后用稀释的DAPI染色在黑暗中培养30分钟。每组四个不同的视野用CLSM随机成像。
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