Sample Collection and RNA Isolation

Sample Collection and RNA IsolationUmbilical cord blood from all infants in the total cohort was processed within 3 hours of delivery; 3 mL of cord blood was placed into Tempus Blood RNA tubes (AppliedBiosystems, Foster City, California) and biobanked at 80C. Total RNA was isolated from the Tempus system using the MagMAX for Stabilized Blood Tubes RNA Isolation Kit as per the manufacturer’s instructions (Ambion, Life Technologies, Austin, Texas). Isolated RNA was subsequently stored at 80C until further processing. Total RNA concentration was quantified using a NanoDrop 8000 Spectrophotometer (ThermoScientific NanoDrop,Wilmington, Delaware). In addition, RNA quality of all samples in the exploratory cohort were assessed using an Agilent 2100 Bioanalyzer (Agilent Technologies Inc, AgilentLaboratories, Santa Clara, California) to ensure purity of samples.

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样品收集和RNA分离 从整个队列在3小时内可交付处理的所有婴儿脐带血; 脐带血3毫升放入的Tempus血液RNA管（应用 生物系统公司，福斯特城，加利福尼亚州）和biobanked在？80？℃。总RNA，使用MagMAX用于稳定血液试管RNA伊索拉？重刑套件按照制造商的说明（Ambion公司，Life Technologies公司，奥斯汀，德克萨斯州）的坦帕斯系统隔离。分离的RNA subse？吸收的敷料储存在？80？C，直到进一步处理。使用NanoDrop分光光度计8000（ThermoScientific纳米滴，总RNA浓度进行定量 威尔明顿，特拉华州）。另外，在探索队列所有样品的RNA质量使用Agilent 2100生物分析仪（安捷伦科技公司，安捷伦进行了评估 实验室，加利福尼亚州圣克拉拉市），以确保样品的纯度。

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Sample Collection and RNA Isolation Umbilical cord blood from all infants in the total cohort was processed within 3 hours of delivery; 3 mL of cord blood was placed into Tempus Blood RNA tubes (Applied Biosystems, Foster City, California) and biobanked at 80C. Total RNA was isolated from the Tempus system using the MagMAX for Stabilized Blood Tubes RNA Isolation Kit as per the manufacturer’s instructions (Ambion, Life Technologies, Austin, Texas). Isolated RNA was subsequently stored at 80C until further processing. Total RNA concentration was quantified using a NanoDrop 8000 Spectrophotometer (ThermoScientific NanoDrop, Wilmington, Delaware). In addition, RNA quality of all samples in the exploratory cohort were assessed using an Agilent 2100 Bioanalyzer (Agilent Technologies Inc, Agilent Laboratories, Santa Clara, California) to ensure purity of samples.

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样品采集与RNA分离 在分娩后3小时内处理所有婴儿的脐带血；将3ml脐带血放入Tempus血RNA管（应用 Biosystems，福斯特市，加利福尼亚）和biobanked at 80 C.根据制造商的说明（Ambion，Life Technologies，德克萨斯州奥斯汀），使用稳定血管RNA分离试剂盒MagMAX从Tempus系统中分离出总RNA。分离出的RNA在80℃下保存至进一步处理。用NanoDrop 8000分光光度计（热科学NanoDrop， 特拉华州威尔明顿）。此外，使用安捷伦2100生物分析仪（安捷伦科技公司，安捷伦）评估探索性队列中所有样本的RNA质量 实验室，加州圣克拉拉）以确保样品的纯度。

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