A 0.7-ll aliquot of each amplicon w

A 0.7-ll aliquot of each amplicon was mixed with 7 ll ofloading dye (98% formamide, 10 m M EDTA, 0.025%bromophenol blue, 0.025% xylene–cyanol). After dena-turation at 95°C for 5 min, samples were rapidly cooled onwet ice and then loaded on 16 9 18 cm, 7% acrylam-ide:bisacrylamide (37.5:1) (Bio-Rad) gels. Electrophoresiswas performed using Protean II xi cells (Bio-Rad), at 220 V for 18 h at 25°C in 0.59 TBE buffer. Gels weresilver-stained according to the method of Byun et al. [9].

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每个扩增子的0.7-LL等分试样与7 LL装运港染料（98％甲酰胺，10个M M EDTA，0.025％溴酚蓝，0.025％二甲苯氰）混合。在95℃下5分钟德纳-turation后，将样品迅速冷却onwet冰中，然后装上16 9月18厘米，7％acrylam-IDE：双丙烯酰胺（37.5：1）（Bio-Rad公司）的凝胶。使用千变万化II XI细胞（Bio-Rad公司）在0.59 TBE缓冲液中进行Electrophoresiswas，在220伏18小时在25℃下。凝胶根据卞等人的方法weresilver染色。[9]。

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每个安培的0.7-ll等分与7ll的加载染料（98%形式酰胺，10m M EDTA，0.025%溴酚蓝，0.025%二甲苯-氰醇）混合。在95°C下，在95°C下进行5分钟的脱粒后，样品在湿冰上快速冷却，然后装在16 9 18厘米，7%的丙烯酰胺：双环酰胺（37.5：1）（Bio-Rad）凝胶上。电泳是使用Protean II xi细胞（Bio-Rad）在220 V在25°C在0.59 TBE缓冲液中18小时进行。根据Byun等人的方法[9]，凝胶被银染色。

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将每个扩增子的0.7 l小份与7 l负载染料（98%甲酰胺、10 m EDTA、0.025%溴酚蓝、0.025%二甲苯-氰醇）混合。在95℃变性5分钟后，样品在湿冰上快速冷却，然后装载在16 9 18 cm，7%丙烯酰胺：双丙烯酰胺（37.5:1）（Bio-Rad）凝胶上。在0.59 TBE缓冲液中，在25℃下，用蛋白聚糖II II细胞（Bier-RAD）进行220小时的电泳。凝胶按照Byun等人的方法进行染色[9]。<br>

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