For live imaging of zebrafish, sele

For live imaging of zebrafish, selected embryos were mounted in low melting point (LMP) agarose (1%, wt/vol) at the bottom of a 29 mm glass bottom dish and covered with fish water at 33°C. Digital micrographs or real‐time tracking images were taken either with a Zeiss Imager.Z1 fluorescence microscope (Carl Zeiss, Germany) or a Leica SP5 resonant scanning confocal (Leica, Germany). Super‐resolution imaging of F‐actin formation in living CTCs in zebrafish was obtained byZeiss LSM 880 Confocal Microscope with Airyscan (Carl Zeiss, Germany). For the entire mouse lung lobes and zebrafish body images, both fluorescent and bright‐field images were taken by Zeiss SteREO Discovery.V20 stereomicroscope (Carl Zeiss, Germany). The tumor size, CTC diameter and actin filaments density analysis were based on fluorescent images and quantified by the corresponding imaging software.

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斑马鱼的实时成像，选择的胚安装在低熔点（LMP）琼脂糖在29毫米的玻璃底培养皿的底部（1％，重量/体积）和在33℃下覆盖有鱼的水。数字显微照片或实时追踪图像用Zeiss荧光Imager.Z1显微镜（Carl Zeiss，德国）或在Leica SP5或者采取共振扫描共聚焦（莱卡，德国）。得到byZeiss LSM 880共焦显微镜用Airyscan（卡尔蔡司，德国）在活在斑马鱼的CTC F-肌动蛋白的形成超分辨率成像。对于整个鼠标肺叶和斑马鱼体内图像，荧光和明视场图像进行采取蔡司立体声Discovery.V20立体显微镜（卡尔蔡司，德国）。肿瘤大小，

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对于斑马鱼的活体成像，选定的胚胎被安装在低熔点（LMP）琼脂（1%，wt/vol）在29毫米玻璃底盘的底部，并在33°C覆盖鱼水。使用蔡司成像器.Z1荧光显微镜（德国卡尔蔡司）或莱卡 SP5 谐振扫描共聚焦（德国莱卡）拍摄数字显微图或实时跟踪图像。Zeiss LSM 880 共聚焦显微镜与 Airyscan（德国卡尔蔡司）一起获得了斑马鱼活CTC中F-actin形成的超分辨率成像。对于整个小鼠肺叶和斑马鱼的身体图像，荧光和明亮的领域图像是由蔡司SteREO发现.V20立体显微镜（卡尔蔡司，德国）。肿瘤大小、CTC直径和作用蛋白丝密度分析基于荧光图像，并通过相应的成像软件进行量化。

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为了对斑马鱼进行实时成像，选择的胚胎被安装在29毫米玻璃底皿底部的低熔点（1%，wt/vol）琼脂糖（LMP）中，并在33°C下覆盖鱼水。数字显微照片或实时跟踪图像由蔡司成像仪拍摄。Z1荧光显微镜（卡尔蔡司，或徕卡SP5共振扫描共焦（徕卡，德国）。利用蔡司LSM 880共聚焦显微镜和Airyscan（德国卡尔蔡司）对斑马鱼活体ctc中F-肌动蛋白的形成进行了超分辨率成像。对于整个小鼠肺叶和斑马鱼体图像，荧光和亮场图像均由蔡司SteREO Discovery.V20立体显微镜（德国卡尔蔡司）拍摄。肿瘤大小、CTC直径和肌动蛋白丝密度分析均基于荧光图像，并通过相应的成像软件进行量化。

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