(B) Abundance of total peptide (C13 and C12 combined) graphed after no的简体中文翻译

(B) Abundance of total peptide (C13

(B) Abundance of total peptide (C13 and C12 combined) graphed after normalization to mean peptide abundance for all peptides mapping to glycolytic enzymes reveals consistent increase in expression of glycolytic enzymes under ischemia, despite overall reduction in translation. (C) Western blots demonstrating translational and post-translational alterations in the enzymes that metabolize pyruvate in the final step of glycolysis in cells surviving severe ischemia including an increase in the levels of LDHA and its activated, phosphorylated form. In addition, phosphorylation of pyruvate dehydrogenase to its inactive form was observed as a band shift toward a higher molecular weight. (D) Despite these alterations, metabolic analyses demonstrated a reduction in glucose uptake for cells surviving severe ischemia (p=.0004). (E) NMR spectroscopy of cell extracts incubated with U-13C-glucose demonstrated alterations in glycolytic flux consistent with the abovedescribed changes in protein expression with a significant reduction in the alanine:lactate ratio (p=.03). (F, G) Chemical inhibition of LDH (LDHi 737, 2.5 µM) resulted in the suppression of lactate excretion for HCC cells grown under standard and ischemic conditions within 24 hours of incubation; however, cells grown under ischemia were unable to survive these conditions when LDH was inhibited (*p
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(B)归一化后绘制的总肽的丰度(组合的C13和C12)表示所有映射到糖酵解酶的肽的均值,尽管局部翻译减少,但在缺血下糖酵解酶的表达持续增加。(C)Western blot证实在严重缺血后细胞中糖酵解的最后一步中,代谢丙酮酸的酶的翻译和翻译后改变,包括LDHA及其活化的磷酸化水平的升高。另外,观察到丙酮酸脱氢酶磷酸化成其无活性形式,因为其向更高分子量的带移。(D)尽管有这些改变,但代谢分析表明,存活严重缺血的细胞的葡萄糖摄取减少(p = .0004)。(E)与U-13C-葡萄糖一起温育的细胞提取物的NMR光谱表明,与上述蛋白质表达的变化一致的糖酵解通量的变化与丙氨酸:乳酸盐的比率显着降低(p = 0.03)。(F,G)LDH(LDHi 737,2.5 µM)的化学抑制作用导致在孵育24小时内在标准和局部缺血条件下生长的HCC细胞的乳酸排泄得到抑制;但是,当LDH被抑制时,在缺血状态下生长的细胞无法在这些条件下存活(* p 5 µM)可抑制在孵育24小时内在标准和局部缺血条件下生长的HCC细胞的乳酸排泄;但是,当LDH被抑制时,在缺血状态下生长的细胞无法在这些条件下存活(* p 5 µM)可抑制在孵育24小时内在标准和局部缺血条件下生长的HCC细胞的乳酸排泄;但是,当LDH被抑制时,在缺血状态下生长的细胞无法在这些条件下存活(* p
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(B) 正常化后绘制的总肽(C13 和 C12 组合)的丰度,以表示所有与糖解酶映射的肽的肽丰度,显示缺血下糖解酶表达的一致增加,尽管翻译总体减少。(C) 在严重缺血期细胞中代谢丙酮酸酶的转化和后转化变化,包括LDHA水平增加及其活性磷酸化形式。此外,观察到苯丙酸酯脱氢酶的磷酸化为非活性形式,因为带向更高的分子量转移。(D) 尽管有这些改变,代谢分析表明,在严重缺血症中存活的细胞的葡萄糖摄入量减少(p=.0004)。(E) 用U-13C-葡萄糖孵育的细胞提取物的NMR光谱表明,糖解通量的变化与上述蛋白质表达的变化一致,丙氨酸:乳酸比显著降低(p=.03)。(F, G)LDH(LDHi 737,2.5 μM)的化学抑制导致在孵育后24小时内抑制在标准条件下生长的HCC细胞的乳酸排泄;然而,在缺血下生长的细胞在LDH被抑制时无法存活下来(*p
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(B) 总肽的丰度(C13和C12结合)在所有肽的平均肽丰度正常化后绘制成图,映射到糖酵解酶,显示在缺血状态下糖酵解酶的表达持续增加,尽管总的翻译减少。(C) Western blots显示在严重缺血后细胞糖酵解最后一步代谢丙酮酸的酶的翻译和翻译后改变,包括LDHA及其活化磷酸化形式的水平增加。此外,丙酮酸脱氢酶磷酸化为其非活性形式是观察到一个带向更高的分子量移动。(D) 尽管有这些改变,代谢分析显示存活的严重缺血细胞的葡萄糖摄取减少(p=0.0004)。(E) 与U-13C-葡萄糖孵育的细胞提取物的核磁共振波谱显示,糖酵解通量的变化与上述蛋白表达的变化相一致,并且丙氨酸:乳酸比率(p=0.03)。(F,G)化学抑制乳酸脱氢酶(LDHi 737,2.5μM)导致在标准和缺血条件下培养的肝癌细胞在24小时内抑制乳酸分泌;然而,在缺血条件下培养的细胞在LDH被抑制时无法存活<br>
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