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Gel entrapment culture of rat hepat
Gel entrapment culture of rat hepatocytes in hollow fibers were evaluated as a potential in vitro model for studies on isoniazid-induced hepatotoxicity. After exposure to isoniazid (0.11 mM and 1.1 mM) for 24-96 h, gel entrapped hepatocytes were more severely damaged than hepatocyte monolayers according to the assays on methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) reduction, intracellular glutathione (GSH) content, reactive oxygen species (ROS) levels, and albumin secretion. Furthermore, CYP 2E1 activity detected by 4-nitrocatechol (4-NC) formation maintained at least 7 days in gel entrapped hepatocytes but decreased to an undetectable level within 2 days in hepatocyte monolayer. And the addition of CYP 2E1 inhibitor, diethyl-dithiocarbamate (DDC), significantly reduced isoniazid-induced GSH depletion in gel entrapped hepatocytes. In addition, the protective effects of N-acetylcysteine (NAC), GSH, liquorice extract and glycyrrhizic acid (GA), a purified compound from liquorice extract, against isoniazid hepatotoxicity were clearly observed in gel entrapped hepatocytes at 72 h incubation. Overall, gel entrapped hepatocytes were more susceptible to isoniazid-induced hepatotoxicity than hepatocyte monolayers by a possible mechanism that higher CYP 2E1 activity in gel entrapped hepatocytes could enhance isoniazid toxicity. This indicates that gel entrapped hepatocytes in hollow fibers could be a more effective model than hepatocyte monolayer for hepatotoxicity research in vitro.
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评价大鼠肝细胞在中空纤维中的凝胶包封培养作为研究异烟肼诱导的肝毒性的潜在体外模型。根据甲基噻唑基四唑（MTT）还原，细胞内谷胱甘肽（GSH）含量，活性氧种类的测定，在异烟肼（0.11 mM和1.1 mM）暴露24-96小时后，凝胶包埋的肝细胞比肝细胞单层损伤更严重。 （ROS）水平和白蛋白分泌。此外，通过4-硝基邻苯二酚（4-NC）形成检测到的CYP 2E1活性在包裹有凝胶的肝细胞中至少维持7天，但在单层肝细胞中在2天内降低到不可检测的水平。CYP 2E1抑制剂二乙基二硫代氨基甲酸酯（DDC）的添加显着降低了异烟肼诱导的凝胶包裹肝细胞中GSH的消耗。此外，在72 h孵育的凝胶中，清楚地观察到N-乙酰半胱氨酸（NAC），谷胱甘肽（GSH），甘草提取物和甘草酸（GA）（一种从甘草提取物中纯化得到的化合物）对异烟肼肝毒性的保护作用。总体而言，凝胶包埋的肝细胞比肝细胞单层更易受到异烟肼诱导的肝毒性，这是由于胶粘肝细胞中较高的CYP 2E1活性可增强异烟肼毒性所致。这表明在体外肝毒性研究中，中空纤维中包埋有凝胶的肝细胞可能比单层肝细胞更有效。在孵育72 h的凝胶包裹的肝细胞中清楚地观察到抗异烟肼的肝毒性。总体而言，凝胶包埋的肝细胞比肝细胞单层更易受到异烟肼诱导的肝毒性，这是由于胶粘肝细胞中较高的CYP 2E1活性可增强异烟肼毒性所致。这表明在体外肝毒性研究中，中空纤维中包埋有凝胶的肝细胞可能比单层肝细胞更有效。在孵育72 h的凝胶包裹的肝细胞中清楚地观察到抗异烟肼的肝毒性。总体而言，凝胶包埋的肝细胞比肝细胞单层更易受到异烟肼诱导的肝毒性，这是由于胶粘肝细胞中较高的CYP 2E1活性可增强异烟肼毒性所致。这表明在体外肝毒性研究中，中空纤维中包埋有凝胶的肝细胞可能比单层肝细胞更有效。
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将中空纤维中大鼠肝细胞的凝胶诱捕培养被评价为研究异氰化诱导肝毒性的一种潜在的体外模型。暴露于异氰酸酯（0.11 mM和1.1 mM）24-96小时后，根据甲基硫磺酸四烯（MTT）减少、细胞内谷胱甘肽（GSH）含量、活性氧物种（ROS）水平和白蛋白分泌物测定法，凝胶捕获的肝细胞比肝细胞单层受损更为严重。此外，4-硝基化技术（4-NC）地层检测到的CYP 2E1活性在凝胶捕获的肝细胞中至少维持7天，但在2天内在肝细胞单层中降至检测不到的水平。并添加CYP 2E1抑制剂，二乙二甲酸酯（DDC），显著减少异异氰胺诱导GSH在凝胶诱捕肝细胞的消耗。此外，在72 h孵育的凝胶中，在含有异丙酸的肝细胞中清楚地观察到N-乙酰半胱氨酸（NAC）、GSH、甘草提取物和甘油酸（GA）的保护作用，这是甘草提取物的纯化化合物，对异丙酸肝毒性有明显作用。总体而言，凝胶诱捕肝细胞比肝细胞单层更容易受到异氰化引起的肝毒性的影响，其可能机制是，凝胶中夹带肝细胞中的CYP 2E1活性较高，可以增强异异氰化毒性。这表明，在空心纤维中夹住肝细胞的凝胶，对于体外肝毒性研究，可能比肝细胞单层更有效。
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以中空纤维凝胶包埋培养大鼠肝细胞作为异烟肼肝毒性研究的体外模型。在异烟肼（0.11mm和1.1mm）作用24-96h后，经MTT还原、细胞内谷胱甘肽（GSH）含量、活性氧（ROS）水平和白蛋白分泌测定，凝胶包裹的肝细胞比单层肝细胞损伤严重。此外，4-硝基邻苯二酚（4-NC）形成检测到的CYP 2E1活性在凝胶包埋的肝细胞中至少维持了7天，但在肝细胞单层中在2天内下降到不可检测的水平。CYP 2E1抑制剂二乙基二硫代氨基甲酸（DDC）的加入显著降低了异烟肼诱导的肝细胞GSH耗竭。此外，在培养72h的凝胶包埋肝细胞中，还观察到N-乙酰半胱氨酸（NAC）、谷胱甘肽（GSH）、甘草提取物和甘草酸（GA）对异烟肼肝毒性的保护作用。总的来说，凝胶包埋的肝细胞比单层肝细胞更容易受到异烟肼诱导的肝毒性的影响，这可能是因为凝胶包埋肝细胞中较高的CYP 2E1活性可以增强异烟肼的毒性。说明中空纤维凝胶包裹肝细胞是一种比单层肝细胞更有效的体外肝毒性研究模型。<br>
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